雌激素受体α下调导致小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤的作用机制

作者：杨焱娜; 张长城; 常言语; 周本文; 陈思敏; 邓何; 赵海霞

来源：中国药理学通报, 2023, 39(09): 1718-1724.

DOI：10.12360/CPB202303010

• 雌激素受体α
• 支持细胞
• TM4细胞
• 自噬
• 连接功能
• 血睾屏障

目的 探究雌激素受体α（estrogen receptor alpha, ERα）下调导致的小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤是否与自噬相关。方法 不同浓度ERα抑制剂ICI182780（ICI）处理TM4细胞，CCK-8法检测细胞增殖活性；将细胞分为正常对照组、不同浓度ICI处理组。光镜观察细胞数量及形态变化；Western blot法检测ERα蛋白、连接功能相关蛋白、自噬标志物蛋白表达变化；免疫荧光法检测缝隙连接蛋白43（Cx43）表达与定位；氯喹（chloroquine, CQ）与ICI联合作用细胞24 h, Western blot法检测自噬及连接功能相关蛋白表达水平。结果 ICI 50 nmol·L-1及以上浓度时，细胞活力明显下降；光镜观察ICI组细胞空泡增多；与正常对照组相比，ICI用药组ERα、闭锁小带蛋白1（ZO-1）、闭锁蛋白（occludin）、紧密连接蛋白11（claudin-11）、β-联蛋白（β-catenin）及Cx43表达水平均下降，而神经钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮钙黏蛋白（E-cadherin）表达无明显变化；微管相关蛋白轻链3（LC3）上升，p62表达下降；免疫荧光结果显示，ICI用药组Cx43荧光表达量明显下降，位置无明显变化；与ICI组相比，CQ+ICI组LC3Ⅱ、p62、ZO-1、β-catenin、Cx43表达水平均上升。结论 ERα下调可导致TM4细胞连接功能损伤，其机制可能与激活自噬有关。