血红素氧化酶-1基因过表达对RAW264.7细胞增殖和凋亡的影响

作者：周茂彬; 李鑫; 李琦; 姬文婕; 焉力方; 闫睿; 周欣; 李玉明

来源：武警后勤学院学报(医学版), 2017, 26(04): 277-280.

DOI：10.16548/j.2095-3720.2017.04.001

• 血红素氧化酶-1
• RAW264.7巨噬细胞
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 慢病毒

【目的】建立血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)稳定过表达细胞株RAW264.7,探讨HO-1过表达对其增殖活性和细胞凋亡的作用。【方法】用携带小鼠HO-1基因的重组慢病毒感染小鼠RAW264.7细胞,经嘌呤霉素筛选获得HO-1稳定过表达细胞株。细胞分为野生型组(WT)、阴性对照组(NC)和过表达组(Lenti-HO-1)。用Real-Time PCR检测细胞中HO-1mRNA的表达。用Western blotting检测细胞中HO-1蛋白的表达。用CCK-8法检测细胞的增殖活性。用流式细胞术检测细胞的凋亡水平。【结果】HO-1慢病毒能促进RAW264.7细胞HO-1 mRNA和蛋白的稳定过表达。Lenti-HO-1组细胞的增殖活性显著低于WT组和NC组(P<0.05)。Lenti-HO-1组凋亡细胞的比例显著高于NC组(P<0.05)。【结论】本研究成功构建了HO-1稳定过表达的RAW264.7细胞株,HO-1过表达能够降低RAW264.7细胞的增殖活性,增加凋亡细胞的比例,其为进一步探讨HO-1在巨噬细胞所参与病理生理机制中的作用奠定了基础。

• 单位
  武警后勤学院