矽肺早期炎症中环状RNA氮6-腺苷酸甲基化修饰差异

作者：罗薇; 王莎; 李永琪; 王静; 杨少奇; 巢杰

来源：中华劳动卫生职业病杂志, 2021, 39(12).

• 巨噬细胞
• 二氧化硅
• 矽肺早期炎症
• 氮6-腺苷酸甲基化修饰
• 环状RNA

目的探究矽肺早期炎症中环状RNA(circRNA)的氮6-腺苷酸甲基化修饰(m6A)差异, 分析circRNA参与矽肺进程的分子机制。方法体外培养人单核细胞系(THP-1)诱导的巨噬细胞, 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测巨噬细胞活化标志物, 细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细胞活力, 确定二氧化硅(SiO2)刺激浓度。比色法测定矽肺模型中总RNA的m6A甲基化修饰变化, 检测m6A甲基化酶、去甲基酶和阅读蛋白表达情况。Arraystar m6A-circRNA表观转录组芯片检测二氧化硅模型组和对照组小鼠肺组织中m6A修饰差异表达的circRNA, 并用荧光实时定量PCR(RT-qPCR)验证遴选出高表达circRNA。结果 SiO2浓度为50 μg/cm2时对THP-1诱导的巨噬细胞活化标志物和细胞活性影响最为明显(P<0.05)。与对照组比较, SiO2引起小鼠原代巨噬细胞和THP-1诱导的巨噬细胞总RNA的m6A水平升高, 甲基化酶METTL3和阅读蛋白YTDHF3表达量明显升高, 差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较, 矽肺模型小鼠肺中132个circRNA的m6A甲基化修饰水平升高, 296个circ RNA的m6A甲基化修饰水平下降, 基于基础表达量筛选得到靶标-circSLC2A13;SiO2引起巨噬细胞中circSLC2A13的表达和m6A化修饰明显升高(P<0.05)。结论矽肺早期炎症阶段存在RNA的m6A甲基化修饰异常现象, 其中circSLC2A13的m6A甲基化修饰参与矽肺早期炎症中巨噬细胞的激活。

• 单位
  公共卫生学院; 东南大学