甘草酸苷调控内质网应激caspase-12凋亡信号通路缓解溃疡性结肠炎结肠炎性反应的研究

作者：沈雁; 吕宾^*

来源：中华中医药杂志, 2020, 35(08): 3872-3877.

• 甘草酸苷
• 溃疡性结肠炎
• 肠上皮细胞
• 凋亡
• 内质网应激
• caspase-12
• 炎性反应

目的:从内质网应激(ERS)角度观察甘草酸苷(GL)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠上皮细胞(IECs)凋亡行为的影响,探讨其缓解UC结肠炎性反应的可能作用机制。方法:①原代小鼠IECs分为空白组、模型组和GL低、中、高剂量组。H2O2刺激法建立细胞ERS模型,GL组造模同时给予GL干预。CCK8法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western Blot法检测细胞中GRP78、caspase-12和caspase-3蛋白的表达水平。②60只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组和GL低、中、高剂量组。DSS诱导法建立小鼠UC模型,GL组造模同时给予GL灌胃10d。评估疾病活动指数(DAI);结肠组织HE染色并评估组织损伤指数(TDI);TUNEL法检测组织IECs的凋亡;免疫组化法检测组织中GRP78、caspase-12和caspase-3蛋白的表达。结果:①与空白组比较,模型组IECs的存活率下降(P<0.01),凋亡率上升(P<0.01),应激凋亡蛋白GRP78、caspase-12和caspase-3的表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,GL中、高剂量组的存活率升高(P<0.05,P<0.01),凋亡率下降(P<0.05,P<0.01),上述凋亡蛋白的表达均下降(P<0.05,P<0.01)。②与空白组比较,UC模型组小鼠的DAI和TDI升高(P<0.01),组织IECs的凋亡个数增多(P<0.01),3个应激凋亡蛋白的表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,GL各剂量组结肠组织IECs的凋亡个数均减少(P<0.05,P<0.01),GL高剂量组的DAI、TDI和3个应激凋亡蛋白的表达均下降(P<0.01)。结论:GL能同时降低小鼠体外应激状态下IECs和UC模型中IECs的凋亡水平,下调细胞内应激凋亡蛋白的表达水平,有效缓解结肠炎性反应,其机制可能与下调ERS水平、抑制ERS介导的caspase-12凋亡信号通路活化有关。

• 单位
  浙江中医药大学