牛膝-杜仲药对治疗糖皮质激素性骨质疏松症的网络药理学分析

作者：张孙正远; 李峻昊; 章喻; 魏元基; 吴宏进; 王成龙; 戴薇薇^*

来源：中药新药与临床药理, 2022, 33(10): 1377-1385.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2022.10.011

• 牛膝
• 杜仲
• 糖皮质激素性骨质疏松症
• 网络药理学
• MLO-Y4骨细胞
• 凋亡
• 体外实验

目的 运用网络药理学方法及体外实验探讨牛膝-杜仲药对治疗糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）的作用机制。方法 利用TCMSP数据库筛选牛膝-杜仲药对的活性成分并预测其作用靶点；利用DrugBank、GeneCards、OMIM、PharmGkb数据库筛选GIOP疾病相关靶点，并与牛膝-杜仲活性成分作用靶点映射取交集，交集基因即为牛膝-杜仲药对治疗GIOP的潜在作用靶点。采用STRING数据库构建潜在作用靶点的蛋白互作（PPI）网络；利用Cytoscape 3.8.2软件构建“活性成分-潜在作用靶点”网络；通过R 4.1.1软件对潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。以牛膝-杜仲（10μg·mL-1）对地塞米松（10-5mol·L-1）诱导损伤的MLO-Y4骨细胞进行干预，采用CCK-8法检测细胞增殖能力，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 从牛膝、杜仲中分别筛选出20、28个活性成分，预测得到976个作用靶点（牛膝、杜仲共同作用靶点205个），筛选出2 006个GIOP疾病相关靶点，最终确定133个牛膝-杜仲药对治疗GIOP的潜在作用靶点。筛选出槲皮素、山柰酚、汉黄芩素、黄芩素、β-胡萝卜素、β-谷甾醇、豆甾醇等关键活性成分；得到JUN、FOS、ESR1、MYC、CDKN1A、AKT1、CCND1、CTNNB1、HIF1A、MAPK14、RELA等核心靶点；KEGG通路富集分析得到166条信号通路，筛选得到与GIOP密切相关的细胞增殖、凋亡相关通路及骨代谢相关通路。体外实验结果显示，与模型组比较，牛膝+杜仲组的细胞存活率明显升高，细胞总坏死率显著降低，差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 牛膝-杜仲药对治疗GIOP具有多成分、多靶点、多途径的特点，可能与其通过槲皮素、山柰酚、黄芩素、β-谷甾醇等活性成分，调控细胞凋亡、自噬、PI3K-Akt、HIF-1等多条信号通路有关。

• 单位
  上海中医药大学附属龙华医院; 中心实验室