棘白菌素B高产菌株Aspergillus delacroxii转化体系的构建与优化

作者：闵涛玲; 高苹; 熊磊; 陈昌发; ***^*

来源：中国医药工业杂志, 2019, 50(09): 981-986.

DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2019.09.006

• 棘白菌素B
• Aspergillus delacroxii
• 农杆菌介导转化

Aspergillus delacroxii SIPI-W15是棘白菌素B的高产菌株,目前尚缺少相关遗传操作信息,极大地限制了其代谢机制和分子机制的研究。本研究考察了Asp.delacroxii SIPI-W15转化过程中的主要影响因素,建立了高效的遗传转化体系:Agrobacterium tumefaciens AGL-1作为介导菌株、新鲜孢子浓度1×106cuf/ml、农杆菌浓度OD600 0.7、24℃共转化3 d。在最佳转化体系下,转化效率可达96个转化子(以106个分生孢子计),外源基因可以稳定遗传。基于上述遗传转化技术,获得棘白菌素B产量提高22%的转化子(产量达到2 468 mg/L),为进一步研究棘白菌素B生物合成的功能基因和提高其产量提供了有力手段。

• 单位
  中国医药工业研究总院; 上海医药工业研究院; 创新药物与制药工艺国家重点实验室