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摘要
为体外表达乌鳢水泡病毒（Snakehead fish vesiculovirus,SHVV）核蛋白（Nucleoprotein,N）、磷蛋白（Phosphoprotein,P）及制备两种蛋白的多克隆抗体，采用分子克隆技术分别将乌鳢水泡病毒N、P基因序列转入pGEX-5x-1原核表达载体，成功构建重组表达质粒后转入大肠杆菌（Escherichia coli）BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达，将所表达的目的蛋白纯化回收后分别免疫新西兰大白兔和小鼠以制备多克隆抗体，采用Western-blot和ELISA检测抗体的特异性和效价，利用间接免疫荧光法检测病毒N、P蛋白在宿主细胞中的分布。结果表明，本研究成功构建了pGEX-5x-1-N和pGEX-5x-1-P重组表达质粒，在大肠杆菌表达系统中诱导表达了73 kD重组N蛋白和57 kD的重组P蛋白，获得了高效价的能特异性识别SHVV的N、P蛋白，抗乌鳢水泡病毒N、P蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光结果表明：乌鳢水泡病毒的N、P蛋白感染细胞后分布在细胞质内。实验所获得的具有免疫原性的抗血清在病毒诊断及病毒蛋白的功能研究中具有很好的应用潜力，可为建立该病毒的免疫学检测方法提供基础。
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