肝再生磷酸酶-3上调缺氧诱导因子-1,α亚基促进结肠癌细胞血管生成的研究

作者：张韬; 罗自通; 蓝球生; 许鹤洋; 褚自强; 苏鹏伟; 褚忠华^*

来源：中华实验外科杂志, 2019, 36(05): 852-854.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.05.020

• 结肠癌
• 血管生成
• 肝再生磷酸酶-3
• 缺氧诱导因子-1α

目的 观察结肠癌细胞中肝再生磷酸酶-3(PRL-3)上调缺氧诱导因子-1(HIF1)-α的表达。方法 构建稳定转染的上调PRL-3(LoVo-P/LoVo-NC)及下调PRL-3的结肠癌细胞株(HT29-P/HT29-NC),通过蛋白质印迹法(Western blot)及定量聚合酶链反应(qPCR)检测结肠癌细胞中HIF1-α及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。取各株细胞上清液,与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)行血管生成试验。将细胞注入小鼠皮下行小鼠成瘤实验后,瘤体切片行免疫组织化学(IHC)观察VEGF及HIF1-α表达差异。应用SPSS 15.0统计软件进行分析。结果 Western blot及qPCR结果显示PRL-3上调后结肠癌细胞中的HIF1-α[LoVo-P/LoVo-NC：4]及VEGF[LoVo-P/LoVo-NC：5.8]表达升高(P<0.05),而敲低PRL-3后HIF1-α[HT29-P/HT29-NC：0.3]及VEGF[HT29-P/HT29-NC：0.2]亦随之表达降低(P<0.05)。血管生成试验提示,PRL-3水平高的细胞培养上清有更好的促血管生成作用[血管生成数为LoVo-P/LoVo-NC：(8±2)条比(2±1)条,HT29-P/HT29-NC：(3±1)条比(11±3)条,(P<0.05]。免疫组化显示结肠癌细胞LoVo-P及HT29-NC分别相对于LoVo-NC及HT29-P在HIF1-α、VEGF的表达上都有明显升高[LoVo-P/LoVo-NC,HIF1-α：89%比33%,VEGF：83%比25%。HT29-P/HT29-NC,HIF1-α：8%比67%,VEGF：12%比82%,t＝9.934、17.890、19.190、106.000、P<0.05]。结论 结肠癌细胞中PRL-3上调HIF1-α的表达从而促进血管生成。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院