表达LacZ基因的重组山羊痘病毒的构建及其生物学特征研究

作者：王芳; 刘胜旺; 邵昱昊; 陈洪岩

来源：中国预防兽医学报, 2007, (09): 655-660.

• 重组山羊痘病毒
• 胸苷激酶基因(TK)
• β-半乳糖苷酶基因(LacZ) recombinant goat pox virus
• thymidine kinase gene(TK)
• β-galactosidase gene(LacZ)

在山羊痘病毒(Goat pox virus,GPV)疫苗株AV41胸苷激酶(Thymidine kinase,TK)基因克隆、鉴定的基础上,构建转移载体质粒。将痘苗病毒(Vaccinia virus,VV)晚期启动子P11和大肠杆菌β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因片段插入含有TK片段同源臂的载体pTK的KpnⅠ酶切位点,经酶切、PCR鉴定筛选出阳性重组子,命名为pTK-LacZ。质粒经纯化后用脂质体法转染感染了GPVAV41株的犊牛睾丸(Bovine testis,BT)细胞,待出现80%以上的细胞病变时收获病毒,经过连续9代蓝色蚀斑筛选、纯化和PCR鉴定,获得纯化的表达LacZ基因、TK功...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所