鸡毒支原体P31蛋白原核表达及膜定位鉴定

作者：李梅; 杨美; 岳筠; 王柏林; 宋春; 朱二鹏; 单春兰; 文明; 程振涛

来源：中国动物传染病学报, 2022, 1-7.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220415.004

• 鸡毒支原体
• P31蛋白
• 原核表达
• 膜定位

为筛选鸡毒支原体（MG）膜蛋白，利用生物信息学软件对其进行序列分析后，选择不含跨膜区的714bp基因片段作为靶标蛋白进行原核表达（因其分子量约31 kD，故而命名为P31蛋白），表达P31蛋白并进行纯化后制备兔多克隆抗体，运用ELISA方法检测抗体效价，提取MG液体培养物总蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白，利用Western-blot进行亚细胞定位。结果显示，P31蛋白具有跨膜结构和良好的B细胞抗原表位，原核表达后获取融合蛋白rP31，大小约为31kDa ，ELISA检测兔血清效价为1：25600，Western-blot分析显示，rP31蛋白分布在MG膜表面。本研究证实了P31蛋白确为MG膜蛋白且抗原性良好，可做为研发MG新型诊断方法、基因工程疫苗及治疗药物的候选蛋白。

• 单位
  贵州大学; 动物科学学院