烟草疫霉PnRXLR5863的克隆及信号肽鉴定

作者:汪询; 杨倩; 周文钊; 柯智; 杨子平*
来源:分子植物育种, 2023, 21(23): 7699-7705.
DOI:10.13271/j.mpb.021.007699

摘要

烟草疫霉引起的剑麻斑马纹病是剑麻生产的主要病害之一。RXLR效应蛋白是疫霉菌中数量最多的一类效应蛋白。为了分离鉴定烟草疫霉中对剑麻产生致病作用的RXLR效应蛋白,本研究基于生物信息分析结合PCR技术克隆候选基因,并利用酵母信号肽捕获系统对信号肽进行功能研究。本研究从烟草疫霉中克隆了一个编码RXLR效应蛋白的基因,命名为PnRXLR5863;该基因长度为402个碱基,编码的蛋白含有134个氨基酸;分子量为15.46 kD,等电点为5.27,是一个疏水性蛋白;SignalP 4.0预测该蛋白含有一个长度为23个氨基酸的信号肽;进化分析结果显示,PnRXLR5863与来自烟草疫霉的蛋白亲缘关系最近;实验结果表明,PnRXLR5863的信号肽,能够使YTK12酵母菌株在CMD-W和YPRAA培养基上生长,并且能将TTC溶液转变为砖红色,表明PnRXLR5863的信号肽具有分泌活性。本研究的结果为进一步研究烟草疫霉侵染剑麻过程中Pn RXLR5863的致病功能提供依据。

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