基于5-乙炔基-2'-脱氧尿苷渗入法的不同细胞增殖检测方法比较

作者：苏程程; 向国安; 马永强; 周欣; 彭守春; 魏路清; 姬文婕

来源：武警后勤学院学报(医学版), 2016, 25(01): 21-24.

DOI：10.16548/j.2095-3720.2016.01.006

• 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷
• 细胞增殖
• 荧光成像
• 流式细胞术

【目的】基于5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Ed U)掺入法,比较利用荧光成像和流式细胞术检测细胞增殖的两种方法。【方法】细胞株采用小鼠巨噬细胞系RAW264.7,在六孔细胞培养板中用盖玻片爬片,Ed U标记后,细胞爬片用荧光成像法,其余细胞用流式细胞术分别检测细胞增殖率。应用Bland-Altman法检测两种方法测量细胞增殖率的一致性,组内相关系数(interclass correlation coefficient,ICC)检测两种方法的重复性。【结果】荧光显微镜下观察呈现明亮绿色荧光的细胞为Ed U标记的处于增殖状态的RAW264.7细胞,其余无绿色荧光的为非增殖期细胞。荧光成像半定量分析的结果显示,约(46.75±16.87)%的细胞处于增殖期;流式细胞术定量结果显示(49.50±3.74)%的细胞处于增殖期,与荧光成像半定量结果比较,未见统计学显著性(P=0.4120)。Bland-Altman一致性检验表明,96.30%的点落在95%一致性区间内,偏倚为-2.750;重复性检测表明荧光成像法所得细胞增殖率的组内相关系数为0.562,小于0.75;流式细胞术所得细胞增殖率的组内相关系数为0.869,大于0.75。【结论】荧光成像法和流式细胞术分析均可用于Ed U标记法检测细胞增殖,与荧光成像相比,流式细胞术分析法操作简便、重复性好。

• 单位
  武警后勤学院