hTPO膜外区基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建

作者：刘金泉; 肖茜; 李宁; 李进; 韩梅; 方佩华

来源：天津医药, 2012, 40(06): 543-546.

DOI：10.3969/j.issn.0253-9896.2012.06.005

• 碘化物过氧化物酶
• 甲状腺
• 遗传载体
• 聚合酶链反应
• 大肠杆菌
• 基因克隆 iodide peroxidase thyroid gland genetic vectors polymerase chain reaction escherichia coli gene cloning

目的:探索克隆人甲状腺过氧化物酶(hTPO)膜外区基因并构建其杆状病毒表达载体。方法:PCR扩增hTPO膜外区基因,并将其先后重组入pGEM3zf(+)质粒和pFastBac1质粒,以hTPO-pFastBAC1质粒转染E.coliDH10Bac大肠杆菌,获得重组hTPO杆状病毒表达载体(hTPO-Bacmid),每一步均以PCR及酶切、基因测序等方法鉴定其正确性。结果:与预期一致,PCR扩增hTPO膜外区基因的产物为一约2.5kb的条带;hTPO-pGEM3zf(+)经EcoRⅠ+HindⅢ、EcoRⅠ+SalⅠ双酶切后均获得2.5和3.2kb条带;hTPO-pFastBAC1以EcoRⅠ+...

• 单位
  天津医科大学总医院