摘要
为从秘鲁鱿鱼(Dosidicus gigas)中提取具有抗氧化活性且Fe2+螯合能力强的蛋白肽,研究采用复合酶解的手段通过响应面法得到了最佳酶解工艺,同时利用膜分离技术对酶解肽分级分离,考察了其氨基酸组成、红外光谱结构以及热稳定性的差异。实验结果表明,复合酶解的最佳工艺条件为:先调整反应体系为pH 7.0,添加木瓜蛋白酶酶解6 h;灭酶后调整pH为8.42,添加碱性蛋白酶酶解2 h,酶添加总量11800 U/g底物,两酶添加配比0.69(即木瓜蛋白酶:碱性蛋白酶=3.41%:4.96%),酶解温度保持55℃,此条件下酶解肽的Fe2+螯合能力为56.35%,DPPH.清除率为64.32%。经SDS-PAGE验证,必需氨基酸含量占氨基酸总含量(EAA/TAA)有显著性差异;红外光谱图显示各级抗氧化肽二级结构中包含了β-折叠、α-螺旋以及无规则卷曲,经酶解暴露出的官能团有羧酸类、氨基酸残基间的酰胺键以及少量的羟基;差示量热扫描结果表明分子质量越小,蛋白肽的耐热性越差。研究结果将为蛋白活性肽的精深应用提供理论支持。
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单位浙江海洋大学; 医药学院