不同细胞标记物对大鼠牙髓干细胞体外标记的生物学影响

作者：谢娜; 姬小婷; 李子夏; 唐成芳; 陆磊; **杨^*

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(06): 735-740.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.06.013

• 牙髓干细胞
• 细胞标记
• CM-DiI
• DAPI
• 大鼠

目的通过体外实验,对比氯甲基苯甲酰氨(CM-DiI)和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)这两种不同细胞标记物对大鼠牙髓干细胞生物学性能的影响,为需要进行细胞标记的实验研究提供理论参考依据。方法采用酶解组织块法培养大鼠牙髓细胞并对其进行纯化,通过免疫组化鉴定细胞来源,并进行细胞体外多向诱导分化能力实验。利用5μg/ml浓度的CM-DiI和DAPI对第3代大鼠牙髓干细胞进行体外标记,通过比较细胞增殖情况以及细胞乳酸脱氢酶释放率,评价标记后细胞生物学状态。结果利用酶解组织块法可获得克隆集落状生长的大鼠牙髓细胞。免疫组化法确定细胞为间充质来源,且具有向脂肪细胞、成骨细胞以及成牙本质细胞分化的潜能。CM-DiI标记后细胞膜及核膜均呈现出红色荧光,DAPI则细胞核蓝染。与未进行细胞标记比较,CM-DiI和DAPI标记后细胞形态、上清液乳酸脱氢酶含量及CCK-8值均无明显变化,两组差异无统计学意义。结论 CM-DiI和DAPI操作简便、染色速度快,都可用于标记大鼠牙髓干细胞。相较DAPI而言,CM-DiI对大鼠牙髓干细胞的细胞毒性更小。

• 单位
  陕西中医药大学附属医院; 西安医学院