新型多胺代谢酶抑制剂SI-4650对结肠癌CT-26细胞增殖的影响及其机制

作者：黄娇娇; 王艳林; 孙丽丹; 曹春雨; 秦烨; 杨建林^*

来源：中国应用生理学杂志, 2020, 36(04): 330-335.

• 多胺代谢酶抑制剂SI-4650
• 结肠癌
• CT-26细胞
• 凋亡
• 自噬

目的:探讨本实验室新发现的新型多胺代谢酶小分子抑制剂SI-4650对结肠癌CT-26细胞增殖、自噬和凋亡的影响。方法:体外培养CT-26细胞,以0μmol·L-1SI-4650处理48 h细胞为正常对照组,单独2.5 mmol·L-13-MA处理细胞为自噬抑制对照组,40、80μmol·L-1SI-4650处理48 h细胞以及3-MA联合40、80μmol·L-1SI-4650处理48 h细胞为4个实验组,化学发光法检测CT-26细胞中多胺代谢酶SMO和APAO酶活性的变化,HPLC法检测细胞中多胺含量的变化,CCK8法检测CT-26细胞增殖能力变化; PI单染结合流式细胞术分析细胞周期; Western blot法分析细胞自噬; PI/FITC-Annexin V双染、JC-1荧光探针和Fluo-3 AM钙离子荧光探针分别结合流式细胞术以及Western blot法分析细胞凋亡。结果:与正常对照组比较,40、80μmol·L-1SI-4650实验组细胞生长抑制率分别为36.98%、46.91%,有效抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01);同时细胞中SMO和APAO酶活性下降(P<0.01);细胞中多胺总含量减少(P<0.01); CT-26细胞被阻滞在G0/G1期(P<0.01);凋亡细胞数分别为7.69%和16.87%,细胞中钙浓度增加(P<0.01)、线粒体膜电位下降(P<0.01),c-PARP、Bax表达增加(P<0.01)、Bcl-2含量减少(P<0.01);以及CT-26细胞中自噬相关蛋离子白Beclin-1、LC3-Ⅱ以及P62含量显著上升(P <0. 01)。与单独40、80μmol·L-1SI-4650处理组相比,2.5 mmol·L-13-MA联合40、80μmol·L-1SI-4650实验组细胞自噬水平下降(P<0.01),凋亡相关蛋白、线粒体膜电位和钙离子浓度变化均减弱(P<0.01),凋亡细胞数减少(P<0.01)。结论:SI-4650有效抑制结肠癌CT-26细胞增殖,机制可能与抑制多胺代谢酶活性,干扰多胺代谢,减少多胺总含量以及诱导细胞周期阻滞、细胞自噬和凋亡相关。

• 单位
  三峡大学