石蒜碱增强顺铂对肝癌HepG2.2.15细胞的细胞毒作用并抑制HBV复制的研究

作者：赖晓琴; 陈文发^*; 黄培瑜; 吴玉珠; 洪等

来源：毒理学杂志, 2023, 37(03): 247-268.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2023.03.005

• 石蒜碱
• 肝癌
• 顺铂
• 凋亡
• 乙肝病毒

目的 探讨石蒜碱对顺铂的肝癌HepG2.2.15细胞毒作用及乙肝病毒(HBV)复制的影响。方法 将HepG2.2.15细胞随机分为对照组、顺铂组、石蒜碱组和顺铂+石蒜碱组。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测HepG2.2.15细胞存活率，流式细胞术检测HepG2.2.15细胞凋亡率，Hoechst 33258染色检测HepG2.2.15细胞凋亡形态，蛋白免疫印迹(Western blot)检测HepG2.2.15细胞B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、乙肝免疫球蛋白(HBsAg)和乙肝核心抗原(HBcAg)蛋白表达水平，Transwell检测HepG2.2.15细胞迁移、侵袭水平，qRT-PCR检测HBV复制水平。结果 与对照组比较，顺铂组HepG2.2.15细胞存活率、迁移数、侵袭数和Bcl-2表达水平明显降低，差异有统计学意义(t值分别为4.508、5.943、4.165、3.799,P<0.05),凋亡率、Bax、cleaved Caspase-3、HBsAg、HBcAg表达水平、HBV复制水平明显增加，差异有统计学意义(t值分别为-11.857、-4.685、-4.609、-10.180、-12.408、-13.295,P<0.05)。与顺铂组比较，顺铂+石蒜碱组HepG2.2.15细胞存活率、迁移数、侵袭数、Bcl-2、HBsAg、HBcAg表达水平和HBV复制水平明显降低(t值分别为3.135、5.260、6.534、4.999、4.852、5.580、8.192,P<0.05),凋亡率、Bax、cleaved Caspase-3表达水平明显增加，差异有统计学意义(t值分别为-8.895、-6.410、-6.431,P<0.05)。Hoechst 33258染色显示，对照组和石蒜碱组细胞核为淡蓝色，形态均匀，顺铂组细胞核为亮蓝色，且出现浓缩、碎裂等凋亡特征，顺铂+石蒜碱组细胞核更亮，凋亡特征更明显。结论 石蒜碱可增强顺铂对HepG2.2.15细胞的细胞毒作用并抑制顺铂引起的HBV复制。

• 单位
  福建医科大学附属第二医院