高效液相色谱法评价海洋生物中半胱亚磺酸脱羧酶活性

作者：张千伟; 徐红萍; 毛丽沙; 金火喜^*

来源：安徽农业科学, 2019, 47(01): 212-215.

• 海洋生物
• 半胱亚磺酸脱羧酶
• 磺基丙氨酸
• 高效液相色谱

[目的]建立磺基丙氨酸(CA)的高效液相色谱分析法,并以CA为底物,评价不同海洋生物组织中半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)的活性。[方法]以Agilent Eclipse XDB-C18为色谱柱,采用邻苯二甲醛(OPA)进行柱前衍生,检测波长为315 nm,对衍生化过程及色谱条件进行了优化。[结果]当CA∶OPA(物质的摩尔比)=1∶2、衍生时间2 min、流动相甲醇∶乙酸钠=65∶35(V/V)、流速1 m L/min时,CA具有最优的检测效果。在该条件下,CA浓度在10～500μg/m L具有良好的线性关系(R2>0.99),平行样品的相对标准偏差为0.9%～8.6%,保留时间为1.4～1.5 min。不同海洋生物组织中CSD活性检测结果显示,在所选择的海洋贝类、头足类、鱼类中,贻贝、疣荔枝螺和大黄鱼均未检测到CSD活性;蛏子、血蛤、芝麻螺和鱿鱼中CSD活性较低。不同组织比较,海鲈鱼肝脏中CSD活性最高,达21.8 U/mg,而肉和鳃中则未检测到CSD活性。[结论]不同海洋生物体内牛磺酸的合成途径不尽相同。

• 单位
  浙江海洋大学; 医药学院