溜曲霉M3b产壳聚糖酶的固体发酵工艺优化及酶学性质

作者：姚炎; 李菁菁; 张雨萌; **鹏; 丁德征; 苏淑慧; 付星^*

来源：华中农业大学学报, 2022, 41(05): 215-222.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2022.05.026

• 溜曲霉
• 壳聚糖酶
• 壳寡糖
• 固体发酵
• 酶活力
• 纯化

为挖掘专一性壳聚糖酶，从多地土壤中筛选出1株高壳聚糖酶活力的真菌M3b，对其进行了形态学观察和18S rDNA序列鉴定，采用单因素试验和正交试验优化固体发酵工艺，研究纯酶的酶学性质。结果显示，菌株M3b为溜曲霉，其最佳产酶发酵条件为：以水为100%计，1%胶体壳聚糖+1%葡萄糖、0.5%硫酸铵、麸皮∶豆粕=6∶10、接种量为10%、发酵6 d、初始发酵pH 7.0、发酵温度32℃。在此条件下酶活力达到20.56 U/mL，是初始发酵条件的221.3%。SDS-PAGE和酶谱分析发现该菌株只产1种壳聚糖酶，分子质量为40 ku。该酶的酶促反应最适pH值为5.5，最适温度为60℃，水解产物聚合度≥2。结果表明，采用溜曲霉进行固体发酵可以显著提高壳聚糖酶的酶活力，降低生产成本，纯化后的壳聚糖酶AtChito40酶学性质稳定，耐酸碱，且能有效地降解壳聚糖。

• 单位
  华中农业大学