siRNA下调EZH2基因对肾癌细胞系769-P增殖的影响

作者：王国栋; 党亚正; 魏铭; 郑甲; 温伟红

来源：现代生物医学进展, 2014, 14(23): 4440-4443.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2014.23.010

• 肾细胞癌
• RNAi
• EZH2

目的:运用小干扰RNA下调果蝇zeste基因增强子人类同源物(enhancer ofzeste homolog 2,EZH2)在肾癌细胞系769-P中的表达,明确其对肾癌细胞增殖的影响。方法:将处于对数生长期769-P细胞分为实验组(experiment group)、阴性对照组(negative group)、空白对照组(blank group),合成靶向EZH2基因的小干扰RNA片段(EZH2-siRNA)和无效序列片段后,通过脂质体介导分别转染至实理组和阴性对照组,空白对照组未做任何处理。以qRealtime-PCR检测EZH2基因mRNA水平的变化情况,以MTT法检测各组细胞增殖变化;流式细胞术(FCM)检测转染后细胞周期变化情况。结果:实理组中EZH2在mRNA表达水平明显受抑制;MTT实验中第4天始,实验组中769-P细胞的增殖能力开始受抑制,第5天时实验组细胞抑制更明显,与阴性对照组和空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA转染后实验组中G0/G1期细胞比例明显增多(81.32±3.14)%,与阴性对照组(44.13±1.52)%和空白对照组(45.71±2.32)%差异有统计学意义。结论:EZH2-siRNA可有效下调并抑制肾癌细胞769-P的增殖,EZH2在肾癌的发生、发展中发挥了重要作用,为下一步研究肾癌基因治疗提供了理论支持。

• 单位
  肿瘤生物学国家重点实验室; 解放军第323医院; 第四军医大学