绵羊干扰素调节因子1基因克隆、序列分析及真核表达

作者：魏立翔; 解艺璇; 高之煜; 曹鑫艳; 张彦兵; 孙延鸣^*

来源：动物医学进展, 2022, 43(10): 12-17.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2022.10.013

• 绵羊干扰素调节因子1
• 生物信息学分析
• 转录因子
• 真核表达

绵羊干扰素调节因子1(interferon regulatory factor 1,IRF1)在病原微生物感染中发挥重要作用。为研究绵羊IRF1功能，以绵羊肺组织cDNA为模板，扩增IRF1基因ORF,并对其序列进行生物信息学分析，构建p3×Flag-CMV-14-IRF1重组质粒。将重组质粒转染HEK293T细胞，运用Western blot进行蛋白质鉴定。结果表明，绵羊IRF1 ORF大小为969 bp,编码325个氨基酸；绵羊IRF1氨基酸序列与山羊、猪、人、马相似性分别为100%、91.61%、87.73%和89.44%;进化树显示，绵羊IRF1与山羊、牛、猪、白鳍豚、马等哺乳动物聚类在一起；绵羊IRF1蛋白分子式为C1596H2497N435O497S17,理论等电点为5.58,具有1个潜在的N-糖基化位点和多个磷酸化位点，无信号肽和跨膜结构域；该重组蛋白高效表达，分子质量约为50 ku。研究结果为绵羊的IRF1功能研究提供了基础材料。

• 单位
  石河子大学; 动物科技学院