鸡传染性喉气管炎病毒TaqMan real-time PCR检测方法的建立

作者:赵妍; 孔聪聪; 张晓敏; 崔红玉; 石星明; 赵晓岩; 薛美; 胡顺磊; 闫帅; 牛秀杰; 李巧玲; 王玫; 王云峰
来源:中国预防兽医学报, 2012, (08): 642-646.

摘要

为建立鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)TaqMan Real-time PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的ILTV gB基因序列设计了2对引物与一条特异性TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件的优化,特异性、敏感性以及重复性试验,证明该方法在核酸含量108拷贝/μL~101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;能够检测初始模板中10-3EID50的病毒核酸及16拷贝的标准品;与其它相关的鸡源病毒均无交叉反应,并且批内、批间变异系数均小于2%,具有良好的重复性。该检测方法的建立为ILTV的临床检测和定量分析提供了一种快速、准确的技术手段。