一个用于黄单胞菌核开关筛选鉴定的GUS报告载体的构建

作者：张云帆; 王家孟; 詹紫璐; 陈泳伶; 杨汇瀛; 唐东阶^*

来源：基因组学与应用生物学, 2023, 1-17.

• 黄单胞菌
• GUS报告载体
• 核开关
• 高通量筛选鉴定

核开关(Riboswitch)是存在于信使RNA(massager RNA， mRNA)分子的5’非翻译区(5’-untranslated region， 5’UTR)的一段具有调控功能的RNA片段，它通过与特定的代谢物分子特异结合来调控所在mRNA自身的表达。核开关广泛存在于细菌中，在调控细菌的基础代谢以及致病等生理过程中发挥非常重要的作用。尽管目前在大肠杆菌(Escherichia coli)等模式细菌中已经鉴定了许多核开关，然而，至今在重要的植物病原细菌黄单胞菌属(Xanthomonas)细菌中只鉴定了一个核开关。为了实现在全基因组水平上对黄单胞菌的核开关进行高通量筛选鉴定，本研究设计和构建了一个β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase，GUS)报告载体pL3-SD+ gusA。该载体既适用于在黄单胞菌属细菌中对候选的核开关进行验证，也可以通过构建基因组DNA表达文库，从而实现对黄单胞菌核开关的高通量筛选鉴定。

• 单位
  广西大学; 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室