pH对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素的降解影响

作者：张盛; 郝玉有; 储炬; 王永红; 郭美锦; 张嗣良; 庄英萍

来源：生物工程学报, 2008, (01): 164-168.

DOI：10.13345/j.cjb.2008.01.021

• pH
• cIFN
• 降解
• 流式细胞仪 pH
• consensus interferon
• protease
• degradation
• flow cytometry
• Pichia pastoris

使用Pichia pastoris表达重组人复合α干扰素(cIFN)会发生降解、聚合等不均一表达的现象。在5 L发酵罐中考察了不同诱导pH对cIFN表达产生降解的影响,结果发现在适合酵母生长的pH 3.0～7.0范围内,当诱导pH为4.0～5.0时,cIFN不均一表达现象最少,生物活性达到2.5×10~8 IU/mL。通过测定发酵液中总蛋白酶活和细胞活性寻找了cIFN降解出现的原因:发现低诱导pH下细胞死亡率升高释放更多酶系,高诱导pH下蛋白酶活性明显增大,两者都使蛋白酶作用加强,加剧cIFN的降解;特别是诱导pH为7.0时,适宜的pH使蛋白酶酶活陡升,将cIFN完全降解。

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室