积雪草酸对异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大的影响

作者：马振国; 张文斌; 徐斯驰; 唐其柱^*

来源：中华生物医学工程杂志, 2015, 21(04): 308-313.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2015.04.004

• 积雪草酸
• 心肌病, 肥厚性
• 异丙肾上腺素
• 氧化性应激

目的探讨积雪草酸(AA)对异丙肾上腺素(ISO)诱导心肌细胞肥大的影响。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2, 分为对照组、ISO组和ISO+AA组。ISO组使用10 mmol/L ISO处理H9c2细胞诱导心肌细胞肥大, ISO+AA组加入不同浓度AA和10 mmol/L ISO处理H9c2细胞, 对照组加入0.5%二甲基亚砜(DMSO)作为溶媒对照。实时定量PCR检测心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、血红素加氧酶1(HO-1)基因的表达, 免疫荧光染色测量心肌细胞横截面积, 免疫印迹法检测心肌肥大相关信号通路改变, 荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧簇(ROS)水平。结果实时定量PCR显示, 与对照组比较, ISO处理48 h后H9c2细胞心肌肥大标志物ANP和β-MHC mRNA表达上调(均P<0.05), 而5、10、20 μmol/L的AA干预48 h可显著降低ISO诱导的ANP和β-MHC mRNA表达上调(均P<0.05), 且具有浓度依赖性;20 μmol/L AA处理H9c2细胞12、24和48 h, 均能抑制ISO诱导的ANP和β-MHC mRNA表达上调(均P<0.05)。免疫荧光染色测量各组心肌细胞横截面积显示, 对照组、ISO组和ISO(10 mmol/L)+AA(20 μmol/L)组心肌细胞横截面积分别为(1 946±49)μm2、(2 952±111)μm2、(2 548±59)μm2。与对照组比较, ISO组心肌细胞横截面积增加, 而20 μmol/L AA能显著降低ISO导致的心肌细胞肥大(均P<0.05)。免疫印迹显示ISO可导致蛋白激酶B(AKT)-糖原合成酶激酶3β(GSK3β)和细胞外信号调节激酶(ERK)-c-Jun氨基末端激酶(JNK)等心肌肥大相关信号通路活化, 而20 μmol/L AA能够抑制上述信号通路的活化。荧光探针DCFH-DA检测显示, 20 μmol/L AA能够明显抑制ISO诱导的细胞内ROS水平增加。实时定量PCR检测显示, 20 μmol/L AA能够明显抑制ISO诱导的GSH-Px、SOD和HO-1 mRNA表达上调。结论 AA可通过抑制AKT-GSK3β和ERK-JNK信号通路减弱氧化应激, 从而抑制ISO所致的心肌细胞肥大。

• 单位
  武汉大学人民医院; 武汉大学