HIF1α-sh RNA表达载体的构建与鉴定

作者:李正堃; 李慧瑾*
来源:科技视界, 2020, (07): 159-161.
DOI:10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2020.07.062

摘要

目的:构建HIF1α-shRNA表达载体并鉴定,为进一步研究其在肿瘤发生发展中的作用奠定基础。方法:设计合成两条互补的编码HIF1α-shRNA的DNA寡核苷酸单链,退火形成互补双链,后将退火产物与酶切线性化的表达载体pG1.1连接后,转化至感受态细胞DH5α中,提取重组质粒并酶切鉴定,挑取克隆正确的重组质粒去测序鉴定插入序列。结果:重组质粒酶切结果显示退火片段连接到pG1.1载体里,经测序分析重组质粒插入序列与合成的寡核苷酸序列一致。结论:HIF1α-shRNA表达载体构建成功,为后续研究提供基础。

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