利用Adeasy-1系统构建npcl基因非复制型腺病毒载体并鉴定

作者：曹小丽; 卜碧涛; 张宇红

来源：中国现代医学杂志, 2004, (23): 14-17,20.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2004.23.004

• 腺病毒载体
• PacⅠ基因
• 基因重组

目的以复制缺陷的腺病毒为载体,细菌内同源重组法构建有npcl基因的腺病毒载体.方法利用限制性内切酶kpnl HindⅢ从带有朊病毒启动子的质粒prp-pro-mlpcl中切下目的基因npcl-1,克隆至穿梭质粒PAdtrack-CMV,再与PAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,经抗性筛选和酶切鉴定的质粒再利用脂质体转染人293例细胞中扩增,利用Adeasy-1系统上的绿色荧光

• 单位
  同济医院; 华中科技大学; 神经内科