前列腺凋亡反应基因4反义寡核苷酸抑制谷氨酸诱导的PC12细胞内钙离子浓度上调及其抗凋亡意义

作者：陆超; 陈吉庆; 吴升华; 赵非; 池霞; 潘晓勤; 费莉; 郭梅; 黄松明; 郭锡熔; 陈荣华

来源：中华病理学杂志, 2005, 34(04): 224-228.

DOI：10.3760/j.issn:0529-5807.2005.04.008

• PC12细胞
• 寡核苷酸类,反义
• 凋亡
• 钙

目的　研究前列腺凋亡反应基因4(par -4)反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞内游离钙离子浓度的上调作用及其抗凋亡意义。方法　脂质体介导转染par -4反义寡核苷酸。谷氨酸诱导PC12细胞凋亡。Hoechest33258 /碘化丙啶荧光染色观察细胞凋亡形态,流式细胞术分析凋亡百分率。Fura 2 /AM荧光染色结合激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度。逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)测定钙依赖性蛋白酶Calpain10的mRNA水平。Western印迹测定par -4蛋白表达量。结果与正常对照组(25 .6±4.1 )相比,谷氨酸诱导PC12细胞中par- 4蛋白表达上调( 90. 0±3 2,P<0. 01),par- 4反义寡核苷酸拮抗其上调( 52 .3±5 .0,P<0 .01 );谷氨酸诱导凋亡组凋亡百分率为53%, par -4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡(31%,P<0. 01);谷氨酸诱导PC12细胞内游离钙离子浓度上调,par- 4反义寡核苷酸拮抗其上调(荧光强度比值分别为167 .9±32 .4、228. 8±36. 8,P<0 .01);谷氨酸诱导PC12细胞内钙依赖性蛋白酶Calpain10mRNA水平上调( 46 .3±3 .7 ),par- 4反义寡核苷酸抑制其上调(34 8±2 1,P<0 01 )。结论　par -4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制细胞内游离钙离子浓度上调和抑制Calpain10基因转录有关。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院