LC-MS代谢组学研究高糖对NRK-52E细胞的损伤机制

作者:陆静; 邓旭; 顾正清; 费悦; 杜岩; 季帅; 郭梦喆; 汤道权*
来源:徐州医科大学学报, 2018, 38(10): 659-663.

摘要

目的 通过液相色谱-质谱联用(LC-MS)代谢组学技术分析高糖干预后细胞内代谢物改变,来评价高糖对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)的潜在损伤机制。方法 NRK-52E细胞经常规培养方法培养12 h后,随机分为低糖组(LG组,5.56 mmol/L,n=6)和高糖组(HG组,25 mmol/L,n=6),继续培养48 h,采用LCMS检测细胞内所含代谢物,利用Mass Profile ProfessionalMPP)软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析(partial least squares to latent structure-discriminant analysis,PLS-DA)寻找差异代谢物。结果 高糖显著损伤细胞形态。细胞代谢物中共鉴定出亮氨酸、神经酰胺(d18:0/12:0,d20:0/16:0,d18:0/16:0,t18:0/16:0,d18:0/14:0)、磷脂酰丝氨酸(16:0/16:0,14:0/12:0,20:0/0:0)、次黄嘌呤、磷脂酰肌醇(17:2/20:2)、溶血磷脂酰乙醇胺(0:0/20:5,0:0/20:2)、磷脂酰乙醇胺(16:0/0:0)等15种差异性代谢物。结论高糖对NRK-52E细胞的损伤与细胞内氨基酸、嘌呤、磷脂等代谢密切相关。