抗猪PABPC1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作者:焦亚娟; 王桦; 孔宁; 孙大格; 董苏洁; 陈晓勇; 翟焕杰; 童武; 郑浩; 于海; 虞凌雪; 童光志; 单同领*
来源:中国动物传染病学报, 2022, 30(05): 135-139.
DOI:10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2022.05.006

摘要

细胞质聚腺苷酸结合蛋白1(PABPC1)是一种mRNA poly A结合蛋白,在维持mRNA稳定和蛋白翻译方面起着重要作用。本研究中将猪源PABPC1基因克隆并插入原核表达载体pCold-Ⅰ中,构建重组表达质粒pCold-pPABPC1。将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并经过IPTG诱导表达重组猪PABPC1蛋白。然后,用纯化的rpPABPC1蛋白免疫BALB/c小鼠以制备PABPC1的单克隆抗体。Western blot结果表明,PABPC1单克隆抗体与PK1细胞和HEK293T细胞中的PABPC1蛋白发生了特异性反应。猪PABPC1特异性单克隆抗体为进一步研究PABPC1的功能提供了有价值的工具。