摘要
目的评价微小核糖核酸-10a(miRNA-10a)在小鼠肾缺血再灌注损伤中的作用及其与转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD家族成员2(Smad2)信号通路的关系。方法 SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠24只, 8~10周龄, 体重20~25 g, 采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(IR组)、肾缺血再灌注+miRNA-10a拮抗剂组(I组)和肾缺血再灌注+miRNA-10a激动剂组(M组)。采用夹闭左侧肾蒂45 min后恢复灌注的方法制备小鼠肾缺血再灌注模型。M组和I组术前72 h时分别尾静脉注射miRNA-10a拮抗剂和激动剂20 nmol, 1次/24 h, 连续3次, S组和IR组给予等容量生理盐水。于再灌注24 h时采集眶静脉血样, 检测血清肌酐(Scr)和BUN浓度。随后处死小鼠取肾组织, 测定肾组织MDA含量和SOD活性, 采用ELISA法测定IL-1β和TNF-α含量, 采用Western blot法检测TGF-β1和磷酸化Smad2(p-Smad2)的表达, 光镜下观察病理学结果并计算肾小管损伤评分。结果与S组比较, IR组、I组和M组血清Scr、BUN浓度、肾组织MDA、IL-1β、TNF-α含量和肾小管损伤评分升高, IR组和M组肾组织SOD活性降低, TGF-β1和p-Smad2表达上调(P<0.05);与IR组比较, I组血清Scr、BUN浓度、肾组织MDA、IL-1β、TNF-α含量和肾小管损伤评分降低, SOD活性升高, TGF-β1和p-Smad2表达下调, M组血清Scr、BUN浓度、肾组织MDA、IL-1β、TNF-α含量和肾小管损伤评分升高, SOD活性降低, TGF-β1和p-Smad2表达上调(P<0.05);与I组比较, M组血清Scr、BUN浓度、肾组织MDA、IL-1β、TNF-α含量和肾小管损伤评分升高, SOD活性降低, TGF-β1和p-Smad2表达上调(P<0.05)。结论 miRNA-10a参与了小鼠肾缺血再灌注损伤的过程, 与激活TGF-β1/Smad2信号通路有关。
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单位天津医科大学; 天津市第一中心医院