活性维生素D通过髓样细胞触发受体1降低糖尿病肾病大鼠肾组织巨噬细胞浸润

作者：赵宇; 郭银凤; 姜彧滕; 刘必成; 张晓良

来源：中华肾脏病杂志, 2017, 33(03): 204-212.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2017.03.008

• 糖尿病肾病
• 受体,免疫
• 骨化三醇
• 巨噬细胞
• 细胞黏附
• 细胞运动

目的探讨活性维生素D(VD)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织中髓样细胞触发受体1(TREM-1)表达的影响及TREM-1对巨噬细胞迁移和黏附功能的作用。方法建立DN大鼠模型,随机分为正常对照(NC)组、VD组(骨化三醇0.1μg·kg-1·d-1灌胃)、DN组、DN+VD组(DN大鼠以0.1μg·k-1·d-1骨化三醇进行灌胃),分别于8周末、12周末处死,PAS和MASSON染色观察肾脏病理改变,Western印迹检测肾组织CD68及TREM-1表达。体外培养RAW264.7细胞,分为NC组、高糖组、高糖+VD组、VD组、乙醇组、甘露醇组。高糖+VD组以10-8mol/L1,25(OH)2D3干预高糖培养的巨噬细胞。免疫荧光和Western印迹检测TREM-1蛋白的表达,Transwell细胞迁移实验和黏附实验评估巨噬细胞的迁移和黏附能力。转染TREM-1siRNA干扰及TREM-1质粒过表达,观察巨噬细胞黏附和迁移情况及1,25(OH)2D3对高糖诱导的巨噬细胞黏附和迁移的影响。结果(1)与对照组比较,DN组大鼠组肾组织CD68及TREM-1表达均增加(均P<0.05),而DN+VD组CD68及TREM-1表达均低于DN组(均P<0.05)。(2)与正常对照组比较,高糖组巨噬细胞黏附、迁移数量和FREM-1的表达均增加(均P<0.05),高糖+VD组巨噬细胞黏附、迁移数量和TREM-1的表达均低于高糖组(均P<0.05)。(3)TREM-1 siRNA干预下,巨噬细胞黏附和迁移数量均低于阴性对照组(均P<0.05),VD能降低高糖诱导的巨噬细胞黏附和迁移(均P<0.05)。(4)在TREM-1过表达巨噬细胞中,细胞黏附和迁移数量与阴性对照组比较均升高(均P<0.05),VD对高糖诱导巨噬细胞黏附和迁移的抑制作用消失。结论活性维生素D通过降低TREM-1的表达抑制高糖诱导的巨噬细胞的黏附和迁移,从而降低巨噬细胞在糖尿病肾组织的浸润。

• 单位
  东南大学; 东南大学附属中大医院