H7N9亚型禽流感病毒HRM检测方法的建立

作者:刘志成; 贾伟新; 孙敏华; 沈海燕; 孙俊颖; 殷三鸿; 钟亮宁; 张建峰; 张春红
来源:中国兽医科学, 2016, (11): 1388-1393.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2016.11.008

摘要

根据H 7N 9亚型禽流感病毒(AIV)的HA和NA基因保守区域,分别设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的H7N9亚型AIV检测方法。结果显示,该方法特异性强,其他常见禽源病毒及非H7亚型和非N9亚型的AIV不能形成特异熔解峰形;灵敏度高,对H7和N9阳性质粒的最低检测限分别达到1.0×101 copies/L和1.0×100 copies/L;重复性好,熔解峰Tm 1和Tm2的批内和批间变异系数均<1%;临床样本检测与某商品化H7N9亚型AIV定量PCR检测试剂盒比较,符合率为100%。该方法可用于临床疑似病例的应急检测、早期诊断及养鸡场、活禽交...

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