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摘要
本研究旨在建立可同时检测犬源牛犬细小病毒(CBoV)和犬圆环病毒(CCV)的二联PCR检测方法，并对两种病毒病当前的流行情况进行监测和调查。分别将已发表的CBoV和CCV基因组序列进行同源性比对，选择高同源区段，应用Primer Primier 5计算机软件设计并合成了2对特异性扩增引物，目的片段大小分别为170 bp (CBoV)和239 bp (CCV)。分别提取CBoV和CCV重组质粒作为模板，进行二联PCR扩增试验。结果表明，本研究成功建立了可同时检测CBoV和CCV的二联PCR检测方法。并对其重复性、特异性和灵敏度进行验证，二联PCR最低检测限度为3.0 pg总DNA,而对犬细小病毒2型、犬瘟热病毒和犬副流感病毒的PCR检测结果均为阴性。对送检的30份病料进行检测，其中，4份为CBoV阳性，3份为CCV阳性，未检测到混合感染。综上所述，本研究所建立的CBoV和CCV二联PCR诊断方法特异性高，敏感性好，可用于临床犬腹泻病的流行病学调查。
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