系统性红斑狼疮患者CD4和CD19细胞miRNA表达差异及对细胞功能的影响

作者：钟馨; 李朝晖; 胡明亮; 缪蕙; 何桂芳; 沈明静; 刘芳; 曾惠芬; 叶素惠; 孙冬尼; 陈红珍

来源：宁夏医科大学学报, 2015, 37(05): 499-519.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2015.05.006

• 系统性红斑狼疮
• CD4
• CD19
• 微小RNA

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血CD4细胞和CD19细胞中微小RNA(miRNA)的表达情况,及外周血CD4细胞和CD19细胞中miRNA异常表达对它们功能的影响。方法密度梯度离心法分离获取健康人及SLE患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),磁珠分选获取CD4细胞和CD19细胞;试剂盒提取miRNA,将每组单个样本miRNA混合成总miRNA,进行人miRNA微阵列分析各个miRNA表达情况;实时荧光定量PCR(real time PCR)验证上述结果;电穿孔法转染miRNA抑制剂或模拟物至外周血CD4细胞和CD19细胞,验证miRNA对CD4细胞和CD19细胞功能的影响。结果 miRNA微阵列分析显示,与健康对照组相比,SLE患者外周血CD4细胞中5种miRNA表达升高(P<0.01),5种miRNA表达降低(P<0.01);CD19细胞中5种miRNA表达升高(P<0.01),9种miRNA表达降低(P<0.01)。Real time PCR验证结果显示,与健康对照组相比,SLE患者外周血CD4细胞中miR-126表达升高(P<0.01),miR-142-3p表达降低(P<0.01);CD19细胞中miR-200b表达升高(P<0.01),miR-17、miR-103和miR-1246表达降低(P<0.01)。进一步功能实验显示,这些异常表达的miRNA与CD4细胞及CD19细胞分泌IL-4、IL-10和IL-21及Ig G相关(P<0.01)。结论 SLE患者外周血CD4细胞和CD19细胞中存在着miRNA的异常表达,且这些miRNA可能参与SLE的发病。

• 单位
  深圳市龙岗中心医院