摘要
目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血CD4细胞和CD19细胞中微小RNA(miRNA)的表达情况,及外周血CD4细胞和CD19细胞中miRNA异常表达对它们功能的影响。方法密度梯度离心法分离获取健康人及SLE患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),磁珠分选获取CD4细胞和CD19细胞;试剂盒提取miRNA,将每组单个样本miRNA混合成总miRNA,进行人miRNA微阵列分析各个miRNA表达情况;实时荧光定量PCR(real time PCR)验证上述结果;电穿孔法转染miRNA抑制剂或模拟物至外周血CD4细胞和CD19细胞,验证miRNA对CD4细胞和CD19细胞功能的影响。结果 miRNA微阵列分析显示,与健康对照组相比,SLE患者外周血CD4细胞中5种miRNA表达升高(P<0.01),5种miRNA表达降低(P<0.01);CD19细胞中5种miRNA表达升高(P<0.01),9种miRNA表达降低(P<0.01)。Real time PCR验证结果显示,与健康对照组相比,SLE患者外周血CD4细胞中miR-126表达升高(P<0.01),miR-142-3p表达降低(P<0.01);CD19细胞中miR-200b表达升高(P<0.01),miR-17、miR-103和miR-1246表达降低(P<0.01)。进一步功能实验显示,这些异常表达的miRNA与CD4细胞及CD19细胞分泌IL-4、IL-10和IL-21及Ig G相关(P<0.01)。结论 SLE患者外周血CD4细胞和CD19细胞中存在着miRNA的异常表达,且这些miRNA可能参与SLE的发病。
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