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摘要
目的 构建表皮葡萄球菌agr阴性突变株 ,以期得到除agr基因以外相同遗传背景的突变株与野生株。方法 首先构建同源重组质粒pBT2 △agr,后电转入金黄色葡萄球菌RN4 2 2 0 ,再转入表皮葡萄球菌 32 98。通过pBT2载体对温度敏感的特点 ,含重组质粒的表皮葡萄球菌 32 98在 4 0℃多次传代 ,最终筛选出agr阴性的突变株。结果 同源重组质粒pBT2 △agr通过酶切鉴定证明构建成功 ,表皮葡萄球菌 32 98接受来自金黄色葡萄球菌RN4 2 2 0的重组质粒 ,经酶切鉴定正确。 4 0℃多次传代后 ,经抗生素抗性筛选 ,并经斑点杂交及序列分析 ,证明获得表皮葡萄球菌 32 98 agr阴性突变株。结论 用同源重组的方法完成表皮葡萄球菌 32 98 agr阴性突变株的构建 ,使agr基因被大部分剔除掉。为今后研究表皮葡萄球菌agr基因在调节其生物膜形成的功能提供实验资料
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