人NIT1基因原核表达载体的构建和鉴定

作者：吴汉林; 王允; 周清华; 朱文; 王艳萍; 车国卫; 陈晓禾; 孙芝琳

来源：中国肺癌杂志, 2005, (02): 81-84.

• 原核表达载体
• 人NIT1基因
• FHIT基因
• 肺肿瘤

背景与目的　目前已知FHIT基因为抑癌基因,其结构和功能的异常与肺癌的发生、发展有密切关系,而且可能与NIT1基因存在功能上的相关性。但是,FHIT基因与NIT1基因调控肺癌发生发展的分子机制尚未明了。本研究旨在构建人NIT1基因原核表达载体,为进一步研究人肺癌细胞株中NIT1 基因和FHIT基因的关系打下基础。方法　应用RT PCR法获得NIT1基因cDNA,定向克隆到融合表达载体pET 32a中,作双酶切和测序鉴定。结果　①克隆的cDNA片断包含了人NIT1基因翻译区的全部序列,翻译区序列与GenBank登录的人NIT1 cDNA序列完全一致。②对构建的原核表达载体做双酶切,获得了预期的目的条带。结论　通过RT PCR和定向克隆的方法,成功构建了人NIT1 基因的原核表达载体,为研究人NIT1蛋白的表达和进一步研究人肺癌细胞中NIT1基因和抑癌基因FHIT的关系奠定了基础。

• 单位
  四川大学华西医院