尿石素A抑制BMMs向破骨细胞分化

作者：周贤豪; 谢幼专^*

来源：医学研究杂志, 2023, 52(07): 97-101.

• 尿石素A
• 破骨分化
• 活性氧

目的 探究尿石素A对小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophages, BMMs)向破骨细胞分化的影响。方法 提取小鼠骨髓腔BMMs,通过CCK-8法检测尿石素A对BMMs的增殖毒性，使用核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand, RANKL)诱导BMMs向破骨细胞分化并与浓度梯度尿石素A共培养，抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)染色检测破骨细胞数量和面积大小，实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法检测破骨分化相关基因水平表达，2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate, DCFH-DA)检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平。结果 CCK-8法检测结果显示，尿石素A在16μmol/L范围内对BMMs无明显毒性；TRAP染色结果表明，尿石素A显著抑制了BMMs向破骨细胞分化，成熟破骨细胞数目和面积减少(P<0.01);RT-qPCR检测结果显示，尿石素A明显抑制了破骨分化相关基因(C-FOS、CTSK、MMP9、ACP5)的相对表达水平(P<0.01);DCFH-DA检测结果显示，尿石素A明显降低了RANKL诱导的高ROS水平。结论 尿石素A能抑制RANKL诱导的BMMs向破骨细胞分化，并降低分化过程中的ROS,有望作为骨质疏松治疗的潜在药物。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院