NGF重组腺病毒在螺旋神经节细胞中的转染特性

作者：池君; 宋武战; 范泉水; 张学渊; 刘丹; 游建军

来源：西南国防医药, 2015, 25(11): 1161-1164.

• 螺旋神经节
• 细胞培养
• 神经生长因子
• 腺病毒
• 转染

目的研究携带有外源性神经生长因子(NGF)基因的重组腺病毒在离体培养的耳蜗螺旋神经节细胞中的转染特性。方法出生3 d健康SD大鼠10只,无菌条件下分离并培养耳蜗螺旋神经节细胞,随机分成A组和B组。培养第72 h时,将携带有NGF重组腺病毒转染A组,而B组不转染,两组细胞均培养14 d。终止培养后,行蛋白质免疫印迹染色检测细胞中NGF含量。结果 B组螺旋神经节细胞培养第5 d生长良好,第10 d部分细胞死亡,第14 d绝大部分细胞死亡。A组细胞培养第5 d,细胞生长良好,第14 d仍有多数细胞贴壁存活。A组细胞转染后第2 d,部分细胞有绿色荧光蛋白表达;第5 d,80%90%细胞发出荧光,荧光表达强;第14 d,有50%细胞发出荧光。转染后螺旋神经节细胞中的NGF含量较转染前高(P<0.01)。结论外源性神经生长因子能在离体培养的螺旋神经节细胞胞体和突起中表达,能延长体外离体培养的螺旋神经节细胞的存活时间。

• 单位
  第三军医大学第一附属医院; 成都军区昆明总医院