水牛白细胞介素2的原核表达与活性鉴定

作者：李小凤; 谢芝勋^*; 范晴; 谢志勤; 谢丽基; 黄娇玲; 张艳芳; 曾婷婷; 王盛; 罗思思; 李孟; 邓显文

来源：动物医学进展, 2021, 42(11): 1-5.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2021.11.001

• 白细胞介素2
• 原核表达
• 纯化
• 抗病毒活性
• 水牛

旨在制备高纯度水牛白细胞介素2(lnterleukin, IL-2)蛋白,为研发新型抗病毒药物奠定基础。通过刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)刺激水牛脾脏淋巴细胞,提取细胞总RNA,利用RT-PCR扩增IL-2基因编码区序列,与表达载体pET-32a连接,构建重组表达质粒pET-32a-IL-2,转入大肠埃希氏菌BL21中,用IPTG诱导目的蛋白表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析、纯化、Western blot鉴定及抗病毒活性评估。结果显示,水牛IL-2编码区序列全长468 bp,共编码155个氨基酸。重组IL-2蛋白主要以可溶性形式表达,表达的IL-2蛋白能与His标记抗体和山羊IL-2多克隆抗体反应,且在牛肾细胞上能有效抑制牛病毒性腹泻病毒引起的细胞病变,具有一定的抗病毒效果。结果表明,重组水牛IL-2蛋白在大肠埃希氏菌中表达量大、纯度高,反应性好,具有较强的抗病毒活性,可作为新型抗病毒药物的候选制品。

• 单位
  广西壮族自治区兽医研究所