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摘要
为获得具有良好抗原性的猪圆环病毒3型（Porcine circovirus type 3，PCV3） Cap重组蛋白，根据实验室已测序获得的一株全基因组序列设计特异性引物，以阳性病料中提取的病毒DNA基因组为模板，通过PCR方法扩增得到PCV3的去核定位信号的Cap蛋白基因，将目的片段插入到pCold TF载体构建pCold TF-dPCV3-Cap重组质粒，然后将其转化到表达宿主菌BL21（DE3）中，通过优化表达和纯化条件，最终获得纯度较高的Cap重组蛋白。SDS-PAGE分析表明该蛋白能够在上清中大量表达并且在IPTG终浓度为1mmol/mL、16℃诱导20 h的条件下表达量最高；Western blot结果证实通过磁珠纯化后的目的蛋白与PCV3阳性血清能够发生特异性反应。因此，重组Cap蛋白具有良好的反应原性和特异性，可以作为研制PCV3多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选靶抗原。
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