神经生长因子干预大鼠骨骼肌卫星细胞增殖及α-肌动蛋白的表达

作者：颜南; 司晓凤; 曾亮; 田伟; 单广东; 熊礼硕; 杨炜杰; 王正东^*

来源：中国组织工程研究, 2021, 25(13): 2030-2035.

• 骨
• 骨骼肌
• 卫星细胞
• 因子
• 神经生长因子
• 细胞培养
• 肌动蛋白
• 细胞增殖

背景:临床研究证实,向神经受损部位注射神经生长因子可改善骨骼肌的运动功能。目的:观察神经生长因子对大鼠原代骨骼肌卫星细胞增殖的影响。方法:采用组织块培养法培养大鼠原代骨骼肌卫星细胞。将第3代骨骼肌卫星细胞分3组培养:对照组加入培养液,低、高浓度组分别加入含10,20 U/mL神经生长因子的培养液。培养2,4,6 d时,倒置相差显微镜与苏木精-伊红染色观察细胞形态,免疫组化染色观察细胞α-肌动蛋白表达;培养1,2,3,4 d后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性。结果与结论:(1)倒置相差显微镜显示,随着培养时间的增加,各组骨骼肌卫星细胞数量逐渐增多,细胞形态由圆形逐渐变为细长的梭形、纺锤形或多角形,并逐渐融合并沿同一个方向排列,并且高浓度组细胞数量多于低浓度组、对照组(P <0.05);(2)苏木精-伊红染色显示,各组骨骼肌卫星细胞轮廓清晰可见,密集分布,胞核较大且深染,组间无明显差异;(3)免疫组化染色显示,各组均可见α-肌动蛋白阳性表达,3组间α-肌动蛋白阳性表达吸光度值比较差异无显著性意义(P> 0.05);(4)CCK-8检测显示,低、高浓度组细胞活力高于对照组(P=0.000);(5)结果表明,高、低浓度的神经生长因子均能促进骨骼肌卫星细胞的增殖,但对α-肌动蛋白表达无影响。

• 单位
  沈阳医学院