外源基因在苏云金杆菌染色体上的定点整合及表达

作者：刘萍; 夏立秋; 胡胜标; 严礼; 丁学知; 张友明; 喻子牛

来源：微生物学报, 2008, (05): 661-666.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2008.05.014

• 苏云金芽孢杆菌
• 定点整合
• 同源重组
• pKSV7
• triggerfactor基因
• cry1Ac基因 Bacillius thuringiensis
• site-specific integration
• homologous recombination
• trigger factor gene
• cry1Ac gene

【目的】研究构建稳定表达外源基因、无抗性标记基因的苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)工程菌的方法。在构建Bt工程菌时,高拷贝外源质粒的转入导致Bt芽孢数量减少,芽孢形成期延滞,影响Bt菌株的杀虫活力。而且,外源质粒在Bt中的稳定性较差,外源基因容易丢失。将基因整合入染色体是一种构建遗传性状稳定、杀虫活力高的Bt工程菌的有效方法。【方法】本研究采用PCR技术,分两段扩增定位于Bt无晶体突变株XBU001染色体上的trigger factor基因片段作为同源臂,克隆入温度敏感型载体pKSV7,构建了定点整合载体pKTF12。并利用pKTF12质粒将cry1Ac基因...

• 单位
  生命科学学院; 湖南师范大学; 农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学