人脐带间充质干细胞来源外泌体促进小胶质细胞向M2极化

作者：周新茹; 金倩; 张蕾蕾; 吴佩佩; 傅强^*; 钱晖^*

来源：江苏大学学报(医学版), 2020, 30(04): 277-281.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y200035

• 间充质干细胞
• 外泌体
• 神经退行性疾病
• 神经炎症
• 小胶质细胞
• 极化
• NF-κB信号通路
• 抑炎

目的:探讨人脐带间充质干细胞外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cells exosomes,huc MSC-Ex)在小胶质细胞极化态转化中的作用及机制,为临床治疗神经退行性疾病提供新的治疗策略。方法:原代分离培养人脐带间充质干细胞,收集其条件培养基提取外泌体(exosomes),电镜、纳米颗粒跟踪分析技术和蛋白质印迹法对其形态特征、粒径大小及表面标志物进行表征;分别用PBS、LPS(1μg/mL)、LPS(1μg/mL)+huc MSC-Ex(100μg/mL)处理小胶质细胞12 h,免疫荧光检测小胶质细胞特异性标志物钙结合蛋白Iba1的表达;蛋白质印迹法检测小胶质细胞M1/M2极化态标志物变化; qRT-PCR检测小胶质细胞IL-1βmRNA和IL-10 mRNA的变化; ELISA检测细胞条件培养基中细胞因子IL-1β和IL-10的分泌量。结果:huc MSC-Ex电镜下呈现典型膜性"杯盘"状结构,纳米颗粒跟踪分析结果显示粒径大小为(119.7±47.9) nm,蛋白质印迹法证实其表达CD9、CD63和CD81特征表面分子;免疫荧光结果显示,活化组(LPS组和LPS+huc MSC-Ex组)钙结合蛋白Iba1相比于静息组(PBS组)表达高,且LPS+huc MSC-Ex组高于LPS组;蛋白质印迹法结合qRT-PCR结果显示huc MSC-Ex可能通过抑制NF-κB活化减少M1极化态标志物i NOS、IL-1β表达,上调M2极化态标志物Arg1、IL-10表达; ELISA结果表明相比于LPS组,LPS+huc MSC-Ex组分泌的炎症因子IL-1β减少、抑炎因子IL-10增加。结论:huc MSC-Ex可能通过抑制NF-κB活化,促进小胶质细胞向M2极化而减少炎症反应。

• 单位
  上海交通大学; 江苏大学