噬菌体展示技术筛选重组干扰素-β蛋白结合蛋白

作者：钟彦伟; 曲建慧; 成军; 戴久增; 吴顺华; 高学松; 郭江; 纪冬; 王琳

来源：中西医结合肝病杂志, 2005, (06): 340-342.

DOI：10.3969/j.issn.1005-0264.2005.06.007

• 噬菌体展示技术
• 干扰素-β (IFN-β )
• 结合蛋白 Phage Display
• Interferon-β Binding Protein

目的:利用噬菌体展示技术筛选重组干扰素β(IFNβ)肝细胞结合蛋白,探讨IFNβ抗病毒的分子生物学机制。方法:应用噬菌体展示技术,以重组的IFNβ蛋白包被酶联免疫板,作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”筛选过程。经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和生物信息学分析。结果:对肝细胞cDNA文库经过5轮的生物淘洗,从最后一轮筛选的顶层琼脂中随机挑选40个克隆,构建克隆载体,序列测定后经过同源性搜索和生物信息学分析,确定了和IFNβ蛋白具有结合作用的肝细胞蛋白。结论:筛选到与IFNβ蛋白具有结合作用的多种具有不同生理、生化功能的...

• 单位
  中国人民解放军第302医院; 北京地坛医院