基于MAPK通路探讨消痈止痢汤对溃疡性结肠炎大鼠的抗炎机制

作者：陈晨; 姜树民^*; 石宇; 隋楠; 于嘉祥; 范继东

来源：时珍国医国药, 2022, 33(07): 1540-1545.

• 消痈止痢汤
• 溃疡性结肠炎
• 促炎性细胞因子
• MAPK信号通路
• NF-κB转录因子

目的 基于丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路，探究消痈止痢汤对葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulphate Sodium Salt, DSS)诱导溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠的治疗作用及机制。方法 将51只SPF级SD大鼠适应性喂养7天后，随机分为正常组和造模组。对造模大鼠自由饮用4.0%DSS溶液，7天建立UC大鼠模型，分为模型组、消痈止痢汤低、中、高剂量组和柳氮磺吡啶组，连续7天灌胃治疗。实验期间，每日记录大鼠的体质量、大便性状及隐血情况，疗程后取材，测量结肠长度、计算疾病活动指数(Disease activity index, DAI)评分，苏木素-伊红(HE)染色后观察组织形态，酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测血清中白介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α、髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)含量，免疫蛋白印迹(Western blot)法对组织中细胞外信号调节激酶(Extracellular Signal-regulated Kinases, ERK)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal Kinases, JNK)、p38MAPK、核因子-κBp65(Nuclear Factor Kappa-B,NF-κBp65)蛋白及其磷酸化(phosphorylation, p)蛋白进行检测，免疫组化法对结肠组织中磷酸化ERK、JNK、p38MAPK、NF-κBp65蛋白进行检测。结果 与正常组比较，模型组结肠长度缩短，DAI评分增高，黏膜破损明显，血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、MPO含量增加，组织中ERK、JNK、p38MAPK、NF-κBp65蛋白及磷酸化蛋白含量均增加(P<0.01);与模型组比较，各剂量中药组及西药组结肠长度增加，DAI评分降低，血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、MPO含量降低(P<0.05,P<0.01);Western blot结果显示：与模型组比较，除了低剂量组在p-JNK蛋白含量上无明显差异外(P>0.05),各不同剂量中药组及西药组组织中ERK、JNK、p38MAPK、NF-κBp65及p-ERK、p-JNK、p-p38MAPK、p-NF-κBp65蛋白水平显著降低(P<0.05,P<0.01);免疫组化结果显示：与模型组比较，消痈止痢汤中、高剂量组和西药组能下调组织中p-ERK、p-JNK、p-p38MAPK、p-NF-κBp65蛋白表达(P<0.05,P<0.01),低剂量组能下调p-ERK、p-NF-κBp65蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论 消痈止痢汤对DSS诱导UC大鼠有显著治疗作用，其机制可能与抑制MAPK信号通路活化，降低促炎性细胞因子分泌与合成，抑制免疫及炎症反应有关。

• 单位
  沈阳医学院; 辽宁中医药大学附属医院; 辽宁中医药大学