大鼠胚胎后肾间充质细胞的分离、培养及鉴定

作者：焦玉清; 易著文; 何小解; 刘喜红; 何庆南; 党西强; 吴小川; 莫双红

来源：生命科学研究, 2008, (01): 66-72.

• 后肾
• 间充质细胞
• 原代培养
• 大鼠

分离、培养大鼠胚胎后肾间充质细胞(MMCS),取孕13d大鼠胚胎,分离胚胎肾脏,去除输尿管芽,消化后置37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养.倒置相差显微镜下观察培养细胞,并行HE染色、电镜观察、生长曲线测定;ABC免疫酶染色法检测波形蛋白、角蛋白、nestin、CD133、CD34;直接免疫荧光法检测双花扁豆凝集素(Dolichos Biflorus,DB),并流式细胞术定量检测.MMCS形态为成纤维细胞样,贴壁生长,48～72h达生长高峰;波形蛋白、nestin、CD133表达阳性;角蛋白、CD34、DB表达阴性;MMCS以DB标记后流式细胞检测为单峰.结果表明:培养细胞为后肾间充质细胞,纯度较高并符合干细胞特征.

• 单位
  中南大学湘雅二医院