丹参酮ⅡA磺酸钠对LPS引起的HUVEC功能异常和凋亡调控作用的研究

作者：尹超云; 潘雅妮; 刘彬; 车媛; 王中群; 陶政^*

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2020, 40(11): 1590-1596.

• 丹参酮ⅡA磺酸钠
• 人脐静脉内皮细胞
• LPS
• IL-1β
• cleaved caspase-3
• cleaved caspase-9

目的:研究丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡA sulphonate,STS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)功能异常和凋亡的调控作用。方法:将第6～8代处于对数生长期的HUVEC按如下分组给予处理:DMEM组、LPS(1.0μg/mL)处理组、高浓度(50.0μg/mL)STS预处理组、中浓度(25.0μg/mL)STS预处理组和低浓度(12.5μg/mL)STS预处理组。其中,各STS预处理组均先以对应浓度的STS预处理HUVEC 2 h,再加入1μg/mL LPS进行刺激。处理24 h后,CCK-8法测定细胞活力;流式细胞术检测细胞增殖;ELISA法检测细胞培养上清中炎症因子白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的蛋白浓度;Western blot法检测细胞裂解液中IL-1β和凋亡相关分子cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表达,以及细胞核蛋白中核因子κB-p65(nuclear factor-κB-p65,NF-κB-p65)的水平。此外,划痕实验检测HUVEC的迁移能力;光镜观察细胞形态变化;DAPI染色显示细胞核染色质的改变;Annexin V/PI双染法检测HUVEC的凋亡情况。结果:与DMEM相比,LPS处理导致HUVEC活力和迁移能力减低,但促进其增殖;IL-1β和NF-κB p65蛋白水平升高;cleaved caspase-3和cleaved caspase-9表达增高并伴有凋亡水平提高(P<0.05)。STS预处理能够以浓度依赖的方式部分或完全逆转LPS引起的上述现象(P<0.05)。结论:STS能够通过浓度依赖的方式抑制LPS引起的HUVEC功能异常和凋亡,对血管内皮起到保护作用。

• 单位
  江苏大学附属医院