甘蔗根系内生真菌染色方法探讨

作者:廖楠; 张金莲; 李冬萍; 汪茜; 龙艳艳; 谭裕模; 李松; 陆祖军; 陈廷速
来源:西南农业学报, 2016, 29(04): 814-819.
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2016.04.016

摘要

为了建立一种甘蔗根系内生真菌最佳的染色方法,便于更好观察甘蔗根际土壤丛枝菌根(Arbuscular mycorrhiza,AM)真菌和深色有隔内生真菌(Dark septate endophytes,DSE)对甘蔗根系的侵染情况。将甘蔗根样置于20%的KOH溶液中90℃水浴透明90120 min;接着加入碱性H2O2脱色60 min;5%的乙酸酸化5 min后,用5%的墨水醋染液(Quink牌纯黑墨水、北京牌蓝黑墨水)、酸性品红、苏丹红Ⅳ、台酚蓝、苯胺蓝为染液,在66℃水浴染色30 min,后用清水浸泡(12 h)脱色后即可镜检。经过碱性H2O2脱色60 min后Quink牌纯黑墨水染色的根系,AM真菌的菌丝和泡囊以及DSE微菌核能够清晰可见。此实验建立的墨水醋染法安全性高而且操作简便,成本低廉。相对于其他染色方法毒性低,对环境的污染小,而且染色效果稳定,更适于观察和镜检拍照。

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