腺病毒载体介导的HSV1-tk报告基因感染心肌细胞后摄取~(125)I-FIAU的实验研究

作者：尹小花; 兰晓莉; 王瑞华; 刘影; 张永学

来源：核技术, 2008, (11): 854-858.

DOI：10.3321/j.issn:0253-3219.2008.11.013

• 报告基因
• 报告探针
• 腺病毒
• 细胞摄取
• 心肌细胞

携带HSV1-tk的重组腺病毒(Ad5-tk)以感染复数(MOI)为20、40、80的病毒滴度感染体外培养的乳鼠原代心肌细胞;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测感染后心肌细胞活力;应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基因转导后心肌细胞内HSV1-tkmRNA的表达情况,并研究对报告探针125I-FIAU的摄取情况。结果显示:不同滴度Ad5-tk感染组心肌细胞存活率与时间均呈负相关,且病毒滴度越大,心肌细胞存活率越低;心肌细胞感染Ad5-tk后24h,RT-PCR即可检测到HSV1-tkmRNA的表达,且MOI=40感染组的表达量高于MOI=20感染组(P<0.01);心肌细胞感染不同滴度Ad5-tk后对125FIAU的摄取与时间呈正相关,且MOI=40感染组在各时间点的摄取率高于其余各组(P<0.01)。表明腺病毒载体介导的报告基因HSV1-tk进入心肌细胞后,能表达生成有活性的磷酸化酶HSV1-TK,使心肌细胞对核素标记报告探针125I-FIAU有明确的摄取,摄取程度与时间呈正相关,且感染滴度为40时摄取率最高,这为活体报告基因心脏显像提供了细胞水平依据。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院